研究背景

氨基甲酸乙酯( ethyl carbamate,EC)是發(fā)酵食品（如黃酒、醬油）和酒精的飲料中的天然副產(chǎn)物，被國際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）列為2A類致癌物。其致癌性源于代謝產(chǎn)物（如乙?；被姿嵋阴キh(huán)氧化物）對DNA的損傷作用。隨著酒精的飲料消費(fèi)量上升，EC暴露風(fēng)險(xiǎn)增加。針對食品中氨基甲酸乙酯的檢測，國標(biāo)GB 5009.223-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中氨基甲酸乙酯的測定》及進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T 0285-2012《出口酒中氨基甲酸乙酯殘留量檢測方法氣相色譜-質(zhì)譜法》中，均以氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）作為標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。氣相色譜-質(zhì)譜法雖然定性、定量準(zhǔn)確，但是涉及到萃取、洗脫、濃縮等極為復(fù)雜的前處理過程，操作復(fù)雜，耗時(shí)長，難以作為快檢技術(shù)指導(dǎo)生產(chǎn)。液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法（LC-MS/MS）因其高靈敏度、優(yōu)異的抗干擾能力，以及高效率，成為EC檢測的新興技術(shù)，尤其適用于復(fù)雜基質(zhì)和痕量分析，為食品安全監(jiān)管、工藝優(yōu)化及健康風(fēng)險(xiǎn)評估提供了可靠工具。本方法在文獻(xiàn)基礎(chǔ)上^[1][2][3]（后附），開發(fā)建立了方便、快捷的LC-MS/MS聯(lián)用的痕量氨基甲酸乙酯分析檢測方法。

實(shí)驗(yàn)部分

儀器、試劑與材料

·Thermo Scientific? Vanquish?超高效液相色譜

·Thermo Scientific? TSQ Altis?三重四極桿質(zhì)譜，配ESI源

·Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 3.0 x 150 mm, 2.7 μm

·蒸餾水（屈臣氏）、甲醇、甲酸（色譜純）

實(shí)驗(yàn)方法

色譜條件

色譜柱：Poroshell 120 EC-C18（3.0 x 150 mm, 2.7 μm）

流速：0.35mL/min

柱溫：40℃

進(jìn)樣量10μL

質(zhì)譜條件：

離子源參數(shù)

SRM掃描模式

結(jié)果與討論

儀器靈敏度、線性范圍和精密度

將高濃度標(biāo)準(zhǔn)品逐級稀釋，配制成系列標(biāo)準(zhǔn)曲線(0.5、2、5、10、20、50ng/mL)考察儀器靈敏度、重現(xiàn)性和線性范圍。

靈敏度：結(jié)果表明氨基甲酸乙酯LOD（S/N≥3）為0.1ng/mL

線性范圍：氨基甲酸乙酯在0.5ng/mL~50ng/mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

重現(xiàn)性：結(jié)果表明，在0.5ng/mL痕量濃度時(shí)氨基甲酸乙酯的的RSD值為2.11%，具有非常好的重現(xiàn)性。

樣品分析

檢測5例客戶樣本，按照本文所建立方法進(jìn)行分析。由下圖可以看出，氨基甲酸乙酯得到了比較好的分析結(jié)果，各離子通道在掃描時(shí)間內(nèi)不存在干擾峰，可準(zhǔn)確定量定性。

樣品實(shí)際分析結(jié)果

結(jié)論

本方法建立了LC-MS/MS測定氨基甲酸乙酯的分析方法。該方法分析速度快，靈敏度高，穩(wěn)定性好，可以滿足痕量氨基甲酸乙酯的分析要求，適合大批量定性和定量分析。

三重四極桿液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀TSQ Altis 現(xiàn)場實(shí)拍圖

參考文獻(xiàn)：

[1]朱懷遠(yuǎn), 莊亞東, 劉獻(xiàn)軍, 朱瑩, 張媛, 尤曉娟, 張映, 熊曉敏. (2013). 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定卷煙主流煙氣中的氨基甲酸乙酯. 分析測試學(xué)報(bào), 32(8), 963 - 967. doi:10.3969/j.issn.1004 - 4957(2013)08-0963-05

[2]Alberts, P., Stander, M. A., & De Villiers, A. (2011). Development of a novel solid-phase extraction, LC - MS/MS method for the analysis of ethyl carbamate in alcoholic beverages: application to South African wine and spirits. Food Additives & Contaminants, 28(7), 826-839.doi:10.1080/19440049.2011.568010

[3]Lee, G., Bang, D., Lim, J., Yoon, S., Yea, M., & Chi, Y. (2017). Simultaneous determination of ethyl carbamate and urea in Korean rice wine by ultra-performance liquid chromatography coupled with mass spectrometric detection

. Journal of Chromatography B.doi:10.1016/j.jchromb.2017.09.011