使用二手液相色譜儀常會遇到漏氣和漏液的狀況， 流動相 是造成二手液相色譜各種問題的最主要源頭。二手液相色譜常見的故障一是堵，二是漏。這里先講堵的原因和辦法。

“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高，直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端，最主要原因就是流動相里有雜質(zhì)，雜質(zhì)的主要來源就是細菌。

一，純水中的細菌污染

　　首先我們要認識到，一般的國產(chǎn)甲醇其實不需要額外過濾處理，直接使用沒有問題。即使是有些固態(tài)微粒雜質(zhì)，也能在液相流路系統(tǒng)最前端的過濾頭上排除，真正容易引起問題的，是水中的細菌。新制備的純水在室內(nèi)放置幾天就會長菌，而這些細菌雖然肉眼不可見，卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙，造成柱子很快報廢。這就是在配制流動相時造成的細菌污染的原因，解決它的方法很簡單，就是確保水的可靠性。  

解決辦法：

　　(1)最理想的方式當然是購買實驗室專用純水機，既方便又可靠，質(zhì)量也放心。

　　(2)成箱購買市場銷售的品牌純凈水，如500ml的怡寶或娃哈哈，這些水的質(zhì)量足以應(yīng)付液相色譜的要求。先隨機抽取一瓶做一下細菌平板實驗，待菌落數(shù)合格方可使用。

流動相過濾

　　(1)流動相過濾在理論上有好處，但是實際操作時由于不可能做到專瓶專用，反而容易造成的交叉污染，對于配比復(fù)雜的流動相影響更大。

　　(2)流動相過濾在經(jīng)濟成本上不劃算。買一套過濾裝置要6000多元，且過濾器公認是比較容易損壞的設(shè)備。最主要是過濾片的成本太高，一片就要幾十元。按一般液相柱的正常使用壽命計算，過濾片的成本會遠遠高于色譜柱的成本上升。

二， 流動相的細菌污染

　　流動相剛開始不長菌，在使用時卻產(chǎn)生了細菌污染。這主要是在使用多元液相色譜儀時的一種不良使用習慣造成的。例如：50%的甲醇水流動相，有兩種使用方式。一種方式是在上機前就配好混合在一起，另一種方式是在流路A放純甲醇，流路B放純水。從單純實驗效果來說，后一種有明顯的優(yōu)點：首先是簡單，不需要實驗者另個計算配比混合，其次就是比例準確，能得到保留時間重復(fù)性極好實驗效果。

　　但是，它有一個致命的缺陷，就是純水在流動相瓶中幾天時間就會長細菌(很多情況下不僅僅用純水作流動相，而是用緩沖鹽溶液，本身就是優(yōu)質(zhì)肥料，細菌長得更迅速)，一旦有細菌柱子就壞得很快。所以這種方式要求操作人員每次實驗都要用新制備的純水，更要求在每次實驗后把水相換掉，換成甲醇沖洗干凈，這一點在實際工作中要多多注意，因為液相色譜柱的堵塞是不可逆的。

　　所以，寧可犧牲小小的保留時間的重復(fù)性，也不要用純水溶液作為流動相。從實際實驗效果來說，我建議用10%的甲醇水代替水溶液(以前我做過不同比例甲醇水的細菌總數(shù)實驗，在5%就基本可以抑菌，在10%及以上就可以完全殺菌了)，這樣可以有效排除長細菌的隱患，既可作流動相，也可沖柱。

三， 不適當操作

　　(1)在更換零件時選擇的型號有誤，接口不是很匹配，在擰緊的時候產(chǎn)生變形而使得管路堵塞。

　　(2)樣品處理液凈化得不干凈，長期會在六通閥和柱之間形阻塞不暢。

　　(3)在使用用手動六通閥時，有些人可能由于手勁小的原因，轉(zhuǎn)動的不到位，于是造成流路形成死堵，壓力快速升高超過警戒值。

　　(4)在使用金屬管路作出廢液管時，應(yīng)當注意最好廢液瓶中先放一些水，并把廢液管的出口端結(jié)晶成塊并造成堵塞。這種情況不常見，但卻的確發(fā)生過。

二手液相色譜儀 查堵的方法

　　在發(fā)生“堵”的現(xiàn)象后，就需要找出原因，主要是什么位置發(fā)生了“堵”。

　　注意，絕大多數(shù)情況下，整個系統(tǒng)只會有一個地方發(fā)生堵塞。 二手液相色譜 查堵的方法是從尾向前逆向分段拆開，仔細觀察壓力數(shù)值，如果某一個部件(柱子除外)裝上和拆下時的壓力差別很大，可發(fā)展變化判斷。至于柱的堵塞，可以通過換同樣規(guī)格的柱的壓力是否一致來判斷。